Autofluorescence adalah isu biasa dalam pengimejan sel yang boleh menjejaskan kualiti dan ketepatan keputusan anda dengan ketara. Sebagai pembekal sistem pengimejan sel terkemuka, saya telah melihat secara langsung bagaimana ini boleh menjadi sakit kepala sebenar bagi penyelidik. Dalam blog ini, saya akan berkongsi bagaimana sistem pengimejan sel kami mengendalikan autofluorescence untuk memastikan anda mendapat imej yang terbaik.
Apakah autofluorescence?
Sebelum kita menyelam bagaimana sistem kita berurusan dengan autofluorescence, mari kita cepat pergi ke atas apa yang berlaku. Autofluorescence adalah pelepasan semula jadi cahaya oleh molekul biologi dalam sel apabila mereka teruja dengan cahaya. Ini boleh datang dari perkara -perkara seperti nadh, flavin, dan porphyrin. Walaupun ia adalah bahagian biasa biologi sel, ia boleh menjadi masalah dalam pengimejan pendarfluor kerana ia boleh membuat isyarat latar belakang yang topeng pendarfluor khusus yang anda cuba untuk mengesan.
Cabaran autofluoresen dalam pengimejan sel
Autofluorescence boleh menyebabkan beberapa masalah dalam pengimejan sel. Pertama, ia dapat mengurangkan nisbah isyarat-ke-bunyi. Apabila terdapat banyak autofluorescence, ia menjadi lebih sukar untuk membezakan isyarat pendarfluor tertentu dari molekul sasaran anda. Ini boleh menjadikannya sukar untuk mengukur jumlah sasaran anda dengan tepat atau melihat butiran halus dalam sel anda.
Kedua, autofluorescence boleh berbeza -beza bergantung kepada jenis sel, keadaan pertumbuhan, dan juga umur sel. Ini bermakna anda mungkin mendapat tahap autofluorescence yang berbeza dalam eksperimen yang berbeza, menjadikannya mencabar untuk membandingkan hasil.
Bagaimana sistem pengimejan sel kami menangani autofluorescence
1. Teknologi Penapis Lanjutan
Salah satu cara utama sistem pengimejan sel kami mengendalikan autofluorescence adalah melalui teknologi penapis lanjutan. Penapis kami direka untuk secara selektif menghantar panjang gelombang cahaya yang sesuai dengan fluorophores tertentu yang anda gunakan, sambil menyekat panjang gelombang yang berkaitan dengan autofluorescence.
Sebagai contoh, jika anda menggunakan protein pendarfluor hijau (GFP) sebagai fluorophore anda, penapis kami akan dioptimumkan untuk lulus cahaya hijau yang dipancarkan oleh GFP sambil menolak autofluoresensi yang berlaku dalam julat panjang gelombang yang sama. Ini membantu mengurangkan isyarat latar belakang dan memperbaiki kontras imej anda.
2. Pencitraan multispektral
Satu lagi alat yang kuat dalam senjata kami ialah pengimejan multispektral. Dengan pengimejan multispektral, sistem kami dapat menangkap imej pada panjang gelombang berganda serentak. Ini membolehkan kita memisahkan isyarat autofluoresensi dari isyarat pendarfluor tertentu.
Kami menggunakan algoritma canggih untuk menganalisis data spektrum dan membuat "cap jari" autofluorescence. Kemudian, kita boleh menolak cap jari autofluorescence ini dari imej keseluruhan, meninggalkan imej bersih pendarfluor tertentu. Teknik ini amat berguna apabila berurusan dengan sampel kompleks di mana autofluorescence mempunyai profil spektrum yang luas.
3. Algoritma pemprosesan imej
Sistem pengimejan sel kami juga dilengkapi dengan algoritma pemprosesan imej lanjutan yang direka khusus untuk mengurangkan autofluorescence. Algoritma ini boleh menganalisis piksel imej dengan piksel dan mengenal pasti kawasan di mana autofluorescence hadir.
Sebaik sahaja kawasan autofluoresensi dikenalpasti, algoritma boleh menyesuaikan intensiti piksel untuk mengurangkan isyarat latar belakang. Ini boleh dilakukan dengan cara yang mengekalkan integriti isyarat pendarfluor tertentu, jadi anda tidak kehilangan sebarang maklumat penting.
Contoh dunia nyata
Mari kita lihat beberapa contoh dunia sebenar bagaimana sistem pengimejan sel kami telah membantu para penyelidik mengatasi isu-isu autofluoresensi.
Kumpulan penyelidikan sedang mengkaji ungkapan protein tertentu dalam sel -sel kanser. Mereka menggunakan antibodi pendarfluor untuk melabelkan protein, tetapi mereka mendapat banyak autofluorescence dari sel -sel, yang menjadikannya sukar untuk melihat pewarnaan tertentu.
Mereka memutuskan untuk menggunakan kamiSistem Pengimbasan Pintar Sel Langsung. Dengan teknologi penapis lanjutan dan algoritma pemprosesan imej, kami dapat mengurangkan latar belakang autofluoresensi. Para penyelidik kemudian dapat melihat corak ekspresi protein dalam sel -sel kanser, yang merupakan kejayaan besar dalam kajian mereka.
Satu lagi contoh ialah pasukan saintis yang bekerja di pencitraan sel hidup. Mereka cuba mengesan pergerakan molekul berlabel fluorescently dalam masa nyata, tetapi autofluorescence dari sel-sel hidup mengganggu pemerhatian mereka.
Mereka beralih ke kamiSistem pengimejan sel hidup. Keupayaan pengimejan multispektral sistem membolehkan mereka memisahkan autofluoresensi dari pendarfluor tertentu molekul berlabel. Ini membolehkan mereka untuk mengesan pergerakan molekul dari masa ke masa dengan tepat, memberikan pandangan yang berharga dalam fungsinya di dalam sel.
Kesimpulan
Autofluorescence adalah cabaran umum dalam pengimejan sel, tetapi ia tidak perlu menjadi sekatan jalan. Sistem pengimejan sel kami direka dengan teknologi dan algoritma canggih untuk mengendalikan autofluoresensi dengan berkesan dan memastikan anda mendapat imej yang berkualiti tinggi dan tepat.
Jika anda bergelut dengan autofluorescence dalam eksperimen pengimejan sel anda, kami ingin membantu. Pasukan pakar kami boleh bekerjasama dengan anda untuk mencari penyelesaian terbaik untuk keperluan khusus anda. Sama ada anda seorang penyelidik dalam akademik atau saintis dalam industri, sistem pengimejan sel kami dapat memberikan anda alat yang anda perlukan untuk mengatasi autofluoresensi dan mencapai matlamat penyelidikan anda.
Jika anda berminat untuk mempelajari lebih lanjut mengenai sistem pengimejan sel kami atau ingin membincangkan pembelian yang berpotensi, jangan ragu untuk berhubung. Kami di sini untuk menyokong anda setiap langkah.
Rujukan
- Johnsen, PA, & Remington, SJ (2008). Autofluorescence dalam sampel biologi. Jurnal Mikroskopi, 230 (1), 79-90.
- Murphy, DB (2001). Asas mikroskopi cahaya dan pengimejan elektronik. Wiley-liss.
